流式细胞仪
发布时间: 2015-12-08 浏览次数: 28

设备名称 

流式细胞仪 

设备型号 

Guava EasyCyte Mini 

设备编号 

2008162201 

生产/供应商 

冷泉港生物科技股份有限公司 

国别 

美国 

设备金额 

466900 

购置年月 

2007.11 

收费标准 

20元/样,每次样品不得少于2个。 

现有功能与服务范围 

对在高速流动的鞘液包括下的经过特异荧光标记的细胞、粒子进行分析和分选。能进行免疫表型检测,细胞周期,细胞凋亡分析。有相关分析软件ExpressPlus或ViaCount或Cell Cycle。 

年使用机时数 

设备存放地点 

兽医综合楼112 

主要技术指标 

1.激光及检测器:488nm Argon激光, 能实现单激光激发4色荧光.具有FS,SS,FL1,FL4检测器。
2.光路设计:直线光路设计, 可互换式光学滤片, 更换滤片后无需进行光路调整。
3.信号处理:数字化信号处理,采用光纤进行信号传输。
4. 颜色补偿:利用软件进行全矩阵颜色补偿。
5.质控系统:能自动绘制质控曲线及储存质控结果。
6. 工作站:PC兼容机, Windows界面数据采集和分析软件. 可以与LIS系统进行联网. 所有数据可直接输出至EXCEL表格。
7. 数据分析:具有PRISM浓缩柱形图功能,能将4色分析的16个结果显示在一张直方图上。
8. 分辨率CV<2%, 灵敏度<100MESF
9. 样本检测速度:三种模式选择: 高, 中, 低三档。
10. 软件:可同时进行数据采集,数据分析及报告结果,带自动化细胞周期分析软件和可溶性蛋白分析软件。
11. 光谱检测范围:300-900nm
12. 颗粒检测范围:0.2—50um

操作规程

1 打开仪器的稳压电源,打开EasyCyte Mini主机背面右上方电源开关,按下主机前面右上方system按钮,进入windows。
2 双击桌面上Cytosoft 软件,软件界面下方状态栏显示“System powered on”及“Laser powered on”,表明仪器已正常开启。在上样之前确保仪器预热15min。
3根据机器的情况,选择每天一次或每周一次,在实验前先作Guava Check。(Guava Check的方法见反面)
4 根据实验目的,选取相关的分析软件(如ExpressPlus或ViaCount或Cell Cycle等)。
5 以ExpressPlus为例子,先点击“new data set” ,选择文件夹-输入文件名(FCS格式)-save,将实验结果保存在文件夹中。
6 在样品信息控制面板检测检查样品浓度:应<=500cell/ul,>=10cell/ul。如果超过500 cell/ul,点击Abort。稀释样品后,重新Adjust或Retrieve settings(调取已经存在的settings文件)。
7 完成调节后,按next step到数据获取的界面,在左上部的样品信息栏中输入待测样品的名称,稀释比例以及样品的体积,系统开始做第一个样品,进而显示结果。
8 当前样品检测结束后,点击左下部的“Save and Close Current Sample”。
 保存当前样品后, 输入下一个待测样品的名称,稀释比例以及样品体积,点击“acquire next sample” 。待剩余样品读取结束后可点击Go To Analysis进入结果分析模式。
9每天实验结束后,要对仪器进行清洗(清洗对流式细胞仪很重要,尤其样品杂质很多的时候)。点击Main Menu,点击clean& shut down。建议每天实验结束后清洗两次,如果不想关机,点击“Clean Only”两次;;如果准备关机,点击“Clean Only”一次,点击“Clean and Shutdown”一次。清洗时按软件界面提示进行,最后在样品管中放置一管新的去离子水。
10 关闭EasyCyte机器电源,关闭稳压电源的开关。
Guava EasyCyte Mini仪器保养和维护注意事项:
1 在每天实验结束后和实验过程中(当样品很多时),按规定运行“Quick Clean”,“Clean”或“Clean & Shutdown”,防止液流通路的阻塞。当样品是血样或其他直接来自动物组织的细胞样品,杂质较多的时候样品要先过滤,并且实验过程中应适当增加清洗的次数。
2 当怀疑液流通路被堵塞或封闭时,您可以在每个实验界面或Guava Check界面,点击Backflush(倒冲)按钮。Backflush为避免污染未检测的样品,需要移开上样管中的样品管。移除样品管,装载上20%漂白剂。Backflush结束后,加入一管去离子水,点击“quick clean”。如果在运行Guava Check时进行Backflush,直接用水倒冲系统。
3 关机时记住在EasyCyte Mini仪器中放置一管去离子水。定时更换装水的管子。
4 不要将Guava的ICF, bleach(漂白剂,5%次氯酸钠)或其他清洁剂放在EasyCyte Mini仪器中过夜或者较长的时间。长时间暴露在强氧化剂中会损伤毛细管。
5当清洗瓶中的ICF只有1/4瓶时,需要在清洗瓶中加入ICF。清洗液通过瓶中的管子进行吸取。不要使清洗瓶空置。这会导致流动池中有气泡产生,需要重新用水冲洗系统。
6 每天实验结束或需要时,要倒空废液瓶。
7 建议每次实验进行check beads检测,确保仪器参数在正常范围,若较长时间没有使用该仪器,必需先进行check beads检测,以确保系统运行正常。
注:Guava Check的方法:取出Check beads和稀释液放至室温,用振荡器充分混匀Check beads,一支管中含190ul稀释液和10ul Check beads,反复吹打或振荡混匀,另一支管中只有190ul稀释液;填入或核对Check beads信息;先上稀释液,点击Adjust Settings,系统自动完成参数设置;混匀后上Beads管,点击Run 1st Replicate, Run 2nd Replicate, Run 3rd Replicate。 结果表中所有数字显示为绿色,仪器正常,可以继续实验。

责任单位 

山东农业大学动物科技学院 

实验室 

兽医平台公用实验室